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什么是凝膠滲透色譜柱

更新時間:2023-12-11      點擊次數:1600

凝膠滲透色譜(Gel Filtration Chromatography)是一種基于凝膠顆粒孔徑大小的分離技術,也稱為分子排斥色譜(Size Exclusion Chromatography)。凝膠滲透色譜柱是用于進行此類分離的專門色譜柱。

凝膠滲透色譜柱是由一種或多種高分子材料制成的,如微球、基質顆粒等。這些高分子材料通常是交聯的,并具有孔徑分布的大小。這些孔徑大小可以根據材料的制造方式進行調整。

樣品在進入凝膠滲透色譜柱時,會與凝膠顆粒相互作用,樣品大分子會被藍色顆粒的微孔所隔離,無法進入顆粒內部,因此進一步阻止了大分子向內層移動的能力。而較小的分子則可以進入顆粒的內部,因此會相對快速地通過凝膠顆粒。這樣,不同分子大小的樣品可以在凝膠滲透色譜柱中分離出來。

凝膠滲透色譜柱的分離能力基于分子量分布的性質,因此特別適用于高分子化學和生物化學的分離和純化。例如,它常用于分離和純化蛋白質、DNA、RNA、糖類和多肽等高分子物質。其分離過程不依賴于分子的化學性質,可以分離富含分子的混合物,同時還可以用于精確分子量的確定。

需要注意的是,選擇適合的凝膠滲透色譜柱時,應根據待分離物質的分子量范圍選擇適當的孔徑大小。如果孔徑過小,則不能分離大分子,如果孔徑過大,則不能分離小分子。

TPChrom Beads凝膠滲透色譜填料的優勢:
高度的粒徑均一性,球形,反壓低,洗脫體積小分離度大,分辨率高,裝柱容易,線性流速大。

產品名稱

粒徑大小um

基質

交聯度%

主要特點

分子排阻極限, Da

TPChrom  Beads X1

42

 

PS/DVB

1

溶脹能力強,較軟,耐壓低適用于中低壓制備色譜

溶脹能力弱,較硬,耐壓高

適用于中高壓制備色譜

14000

TPChrom  Beads X3

3

1000-2000

TPChrom  Beads X8

8

400-1000

TPChrom  Beads X12

12

≤400


凝膠滲透色譜柱適用于有機溶劑體系半微量的高性能的SEC分析柱。由粒徑均一,但每個填料上分布大小不同的孔,即由細孔多分散型均一粒徑的填料裝填而成。從而實現了校正曲線的優異的線形相關關系。
 
使用細孔多分散型分析柱獲得的校正曲線沒有變曲點。因而色譜圖中的測定峰形不會出現不規則的凹凸現象可提供適用于分子量分布范圍不同的三種規格分析柱。

GPC凝膠滲透色譜柱

GPC凝膠滲透色譜柱

凝膠滲透色譜柱的結構及主要功能:

由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲(封頭)與柱填料等組成。
(1)柱管:多用不銹鋼制成,若果使用時柱壓不高于70kg/cm2時,也可采用厚壁玻璃或石英管,管內壁要求有很高的光潔度。用于柱填料的裝填。
(2)壓帽:即色譜柱兩端套合于柱管端外壁的塑性圓柱帽,中部有小孔,多為聚四氟乙烯制成,用于固定篩板。
(3)密封環:位于接頭螺旋環內壁的彈性環,多為聚四氟乙烯制成,用于色譜柱兩端壓帽與柱外壁的密封。
(4)篩板:位于色譜柱兩端緊貼柱管端的篩網狀薄片,由燒結不銹鋼或鈦合金制成,孔徑取決于填料粒度,一般為0.2~20&um。用于防止填料從柱管內漏出。
(5)接頭:柱兩端連接流動相與柱管的中空環套,由不銹鋼制成。用于柱管路聯通與柱端高壓固定。
(6)封頭:柱兩端的密封螺絲,用于保存色譜柱時封頭。
(7)柱填料:裝填于柱管內的固定相擔體,其直接決定了色譜柱的類型與用途,是色譜柱的核心。多為無定形或球形硅膠基質,也有環糊精、活性炭、聚苯乙烯-二乙烯基苯、聚甲基丙酸酯、氧化鋁等基質。用于色譜分離。

凝膠滲透色譜柱是一種強大的高分子分離和純化工具,可廣泛應用于化學和生物學領域。 

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